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卵巢癌腹水小鼠模型构建方法的优化与评价
杨茜;张若;陈芝;张晓帆;黄建鸣;张国楠
(1.成都中医药大学临床医学院;2.电子科技大学医学院;3.四川省肿瘤医院·研究所生物与分子学院;4.四川省肿瘤医院·研究所四川省肿瘤临床医学研究中心四川省癌症防治中心四川省卫健委妇科肿瘤学医学重点实验室电子科技大学附属肿瘤医院妇瘤科)
摘要:
目的:评估经体内传代优化的ID8细胞构建卵巢癌(OC)腹水模型的成模率与免疫功能,以获取更符合临床特征且适于免疫评估的模型。方法:C57BL/6J雌性小鼠随机分为对照组、模型组[原代细胞组(3×10~6/只)、高传代细胞组及低传代细胞组(3.0×10~6个/只、1.5×10~6个/只)]。建模成功后检测腹水量、脾脏指数,并行腹膜组织苏木精-伊红(HE)染色、免疫组织化学(IHC)及流式细胞术分析。结果:与对照组相比,模型组腹水量与脾脏指数均增加(P<0.01),HE染色符合OC转移特征,提示模型构建成功;其中,传代细胞组成模时间缩短至14 d,成模率100%,但高传代细胞组的死亡率为25%。与对照组比较,IHC示原代细胞组、高传代细胞组及低传代细胞组腹膜组织中程序性死亡配体-1(PD-L1)组织化学评分(P<0.01,P<0.01,P<0.05),CD8阳性细胞数(P均<0.05)及淋巴细胞活化基因3蛋白(LAG3)阳性细胞率(P<0.01,P<0.01,P<0.05)均增加;流式细胞术示模型组腹水细胞中的CD8+T细胞比例均降低(P<0.01),而CD8+T细胞中的PD-1(P<0.01)、LAG3(P<0.01)及TIM3(P<0.05)比例增加;而高传代细胞组、低传代细胞组的CD8+T细胞中的PD-1及LAG3比例均高于原代细胞组(P<0.01,P<0.05)。结论:优化后的低剂量传代OC腹水模型具有成模快、稳定性好的特点,可有效模拟腹水的免疫抑制与T细胞耗竭微环境,适用于OC腹水免疫机制及治疗研究。
关键词:  卵巢癌  腹水  动物模型  体内传代  
DOI:
基金项目:四川省科技厅重点研发项目(编号:2019YFS0036);
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Abstract:
Key words:  

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