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| 目的:评估经体内传代优化的ID8细胞构建卵巢癌(OC)腹水模型的成模率与免疫功能,以获取更符合临床特征且适于免疫评估的模型。方法:C57BL/6J雌性小鼠随机分为对照组、模型组[原代细胞组(3×10~6/只)、高传代细胞组及低传代细胞组(3.0×10~6个/只、1.5×10~6个/只)]。建模成功后检测腹水量、脾脏指数,并行腹膜组织苏木精-伊红(HE)染色、免疫组织化学(IHC)及流式细胞术分析。结果:与对照组相比,模型组腹水量与脾脏指数均增加(P<0.01),HE染色符合OC转移特征,提示模型构建成功;其中,传代细胞组成模时间缩短至14 d,成模率100%,但高传代细胞组的死亡率为25%。与对照组比较,IHC示原代细胞组、高传代细胞组及低传代细胞组腹膜组织中程序性死亡配体-1(PD-L1)组织化学评分(P<0.01,P<0.01,P<0.05),CD8阳性细胞数(P均<0.05)及淋巴细胞活化基因3蛋白(LAG3)阳性细胞率(P<0.01,P<0.01,P<0.05)均增加;流式细胞术示模型组腹水细胞中的CD8+T细胞比例均降低(P<0.01),而CD8+T细胞中的PD-1(P<0.01)、LAG3(P<0.01)及TIM3(P<0.05)比例增加;而高传代细胞组、低传代细胞组的CD8+T细胞中的PD-1及LAG3比例均高于原代细胞组(P<0.01,P<0.05)。结论:优化后的低剂量传代OC腹水模型具有成模快、稳定性好的特点,可有效模拟腹水的免疫抑制与T细胞耗竭微环境,适用于OC腹水免疫机制及治疗研究。 |
| 关键词: 卵巢癌 腹水 动物模型 体内传代 |
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| 基金项目:四川省科技厅重点研发项目(编号:2019YFS0036); |
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