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| 目的:筛选子宫颈癌淋巴结转移相关环状 RNA(circRNA)的差异表达谱,分析其功能和作
用机制。 方法:收集 40 例子宫颈癌患者[有淋巴结转移 20 例(转移组)、无淋巴结转移 20 例(未转
移组)]的癌组织标本。 在两组中随机各选取 3 例标本,采用高通量测序技术分析 circRNA 表达谱,
并对差异表达 circRNA 来源的母基因进行京都基因与基因组百科全书(KEGG)和基因本体(GO)富
集分析。 采用实时荧光定量 PCR(qRT-PCR)技术验证差异倍数较高的 4 个显著上调的 circRNA,行
数据库预测构建竞争性内源性 RNA(ceRNA)网络。 对差异表达最显著的 circRNA 分析其与临床病
理特征的关系,行子宫颈癌细胞系转染 circRNA 小干扰 RNA(siRNA),分为 circ RNA 敲低组和阴性
对照(si-NC)组,并采用活细胞计数(CCK-8)方法检测子宫颈癌 SiHa 细胞和 HeLa 细胞的增殖情况。
结果:①共检测到 2039 个差异表达 circRNA,差异表达 circRNA 来源的母基因主要富集在泛素介导
的蛋白质水解、MAPK 信号通路、内吞作用、细胞凋亡等信号通路。 ②筛选出转移组中差异倍数较高
的 4 个显著上调的 circRNA,即 hsa_circ_0067492、hsa_circ_0004904、hsa_circ_0085465、hsa_circ_
0007718。 qRT-PCR 技术验证显示,hsa_circ_0004904、hsa_circ_0085465、hsa_circ_0007718 在淋巴结
转移的子宫颈癌组织中均高表达(P < 0. 01)。 hsa_circ_0004904 可与 hsa-miR-3916 等微小 RNA
(miRNA)相互作用、hsa_circ_0085465 可与 hsa-miR-4659b-3p 等 miRNA 相互作用、hsa_circ_0007718
可与 hsa-miR-127-5p 等 miRNA 相互作用。 ③hsa_circ_0004904 的高表达与低表达在有无淋巴结转
移和脉管癌栓中差异有统计学意义(P < 0. 05)。 与 si-NC 组相比,沉默 hsa_circ_0004904 转染 24、
48、72 h 后,SiHa 细胞和 HeLa 细胞的增殖能力均明显降低(P < 0. 05)。 结论:伴有淋巴结转移的子
宫颈癌中存在差异表达的 circRNA,沉默后可显著抑制子宫颈癌细胞的增殖,其可能参与了淋巴结
转移的发生发展,有望成为淋巴结转移的特异性生物标志物。 |
| 关键词: 子宫颈癌 环状 RNA 淋巴结转移 竞争性内源性 RNA 非编码 RNA |
| DOI： |
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| 基金项目:河南省医学科技攻关计划联合共建项目(编号:LHGJ20220476);2024 年度河南省高等学校重点科研项目(编号:24B320029) |
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