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Y-box结合蛋白1通过沉默信息调节因子1mRNA稳定性调节抑制人颗粒细胞凋亡在早发性卵巢功能不全中的作用与机制
卢敏君;李文昕;林莉;刘月琴;朱小兰
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(江苏大学第四附属医院:a. 生殖医学中心、b. 中心实验室,江苏 镇江 212001)
摘要:
目的:探讨 Y-box 结合蛋白 1(YBX1)调节沉默信息调节因子 1(SIRT1)对颗粒细胞增殖和 凋亡的影响,研究 YBX1 和 SIRT1 在早发性卵巢功能不全(POI)患者及卵巢功能正常患者间表达水 平差异及临床意义。 方法:留取 2022 年 6 月至 2023 年 7 月于江苏大学第四附属医院生殖医学中心 进行体外受精(IVF) / 卵胞浆内单精子注射(ICSI)助孕的 POI 患者(POI 组)及卵巢储备功能正常患 者(对照组)的颗粒细胞和血清,利用免疫印迹(WB)检测 YBX1 蛋白表达水平;利用实时荧光定量 核酸扩增法( RT-qPCR) 检测 YBX1 及 SIRT1 mRNA 表达水平,并分析血清中其与卵泡刺激素 (FSH)、促黄体生成素(LH)、雌二醇(E2 )、抗苗勒管激素(AMH)、窦卵泡数(AFC)的相关性;利用 5-溴-2-脱氧尿嘧啶(EdU)、细胞计数试剂 8(CCK8)检测细胞增殖、原位末端标记法(TUNEL)检测细 胞凋亡;RT-qPCR 检测细胞内增殖细胞核抗原(PCNA)、B 细胞淋巴瘤因子-2(Bcl2)、Bcl2 相关 X 蛋 白(BAX)、胱天蛋白酶-3(Caspase-3)mRNA 表达情况;RNA 免疫沉淀(RIP)实验检测 YBX1 与 SIRT1 的相互作用。 结果:与对照组患者相比,POI 组患者颗粒细胞和血清中 YBX1 蛋白及 SIRT1 mRNA 的表达降低(P < 0. 05);血清中 YBX1、SIRT1 mRNA 表达与 FSH、LH 负相关(r < 0,P < 0. 05),与 E2 、 AMH、AFC 正相关(r > 0,P < 0. 05);在颗粒细胞中上调 YBX1 后 SIRT1 蛋白表达量、SIRT1 mRNA 的 稳定性、EdU 阳性率、细胞活性、PCNA mRNA 表达量、Bcl2 / BAX 比值均增加(P < 0. 05),Caspase-3 mRNA 表达量、TUNEL 阳性率均降低(P < 0. 05)。 结论:YBX1 和 SIRT1 在 POI 患者中表达水平显 著下调,且其表达水平与临床卵巢功能指标相关;YBX1 结合 SIRT1 mRNA 增强其稳定性,可能促进 颗粒细胞增殖,抑制细胞凋亡,提示 YBX1 和 SIRT1 有望成为 POI 诊疗的新靶点。
关键词:  早发性卵巢功能不全  Y-box 结合蛋白 1  沉默信息调节因子 1  颗粒细胞  细胞增殖和 凋亡
DOI:
基金项目:国家自然科学基金(编号:82172838);江苏省自然科学基金(编号:BK20201227)
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Abstract:
Key words:  

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