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目的:探讨 Y-box 结合蛋白 1(YBX1)调节沉默信息调节因子 1(SIRT1)对颗粒细胞增殖和
凋亡的影响,研究 YBX1 和 SIRT1 在早发性卵巢功能不全(POI)患者及卵巢功能正常患者间表达水
平差异及临床意义。 方法:留取 2022 年 6 月至 2023 年 7 月于江苏大学第四附属医院生殖医学中心
进行体外受精(IVF) / 卵胞浆内单精子注射(ICSI)助孕的 POI 患者(POI 组)及卵巢储备功能正常患
者(对照组)的颗粒细胞和血清,利用免疫印迹(WB)检测 YBX1 蛋白表达水平;利用实时荧光定量
核酸扩增法( RT-qPCR) 检测 YBX1 及 SIRT1 mRNA 表达水平,并分析血清中其与卵泡刺激素
(FSH)、促黄体生成素(LH)、雌二醇(E2 )、抗苗勒管激素(AMH)、窦卵泡数(AFC)的相关性;利用
5-溴-2-脱氧尿嘧啶(EdU)、细胞计数试剂 8(CCK8)检测细胞增殖、原位末端标记法(TUNEL)检测细
胞凋亡;RT-qPCR 检测细胞内增殖细胞核抗原(PCNA)、B 细胞淋巴瘤因子-2(Bcl2)、Bcl2 相关 X 蛋
白(BAX)、胱天蛋白酶-3(Caspase-3)mRNA 表达情况;RNA 免疫沉淀(RIP)实验检测 YBX1 与 SIRT1
的相互作用。 结果:与对照组患者相比,POI 组患者颗粒细胞和血清中 YBX1 蛋白及 SIRT1 mRNA
的表达降低(P < 0. 05);血清中 YBX1、SIRT1 mRNA 表达与 FSH、LH 负相关(r < 0,P < 0. 05),与 E2 、
AMH、AFC 正相关(r > 0,P < 0. 05);在颗粒细胞中上调 YBX1 后 SIRT1 蛋白表达量、SIRT1 mRNA 的
稳定性、EdU 阳性率、细胞活性、PCNA mRNA 表达量、Bcl2 / BAX 比值均增加(P < 0. 05),Caspase-3
mRNA 表达量、TUNEL 阳性率均降低(P < 0. 05)。 结论:YBX1 和 SIRT1 在 POI 患者中表达水平显
著下调,且其表达水平与临床卵巢功能指标相关;YBX1 结合 SIRT1 mRNA 增强其稳定性,可能促进
颗粒细胞增殖,抑制细胞凋亡,提示 YBX1 和 SIRT1 有望成为 POI 诊疗的新靶点。 |
关键词: 早发性卵巢功能不全 Y-box 结合蛋白 1 沉默信息调节因子 1 颗粒细胞 细胞增殖和
凋亡 |
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基金项目:国家自然科学基金(编号:82172838);江苏省自然科学基金(编号:BK20201227) |
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