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| 目的:探讨ATP结合盒转运蛋白A1(ABCA1)对胎盘脂质代谢的影响。方法:应用酶消化法分离胎盘原代滋养细胞,流式细胞术进行细胞纯度鉴定,免疫荧光检测细胞中ABCA1的表达情况。实验组应用肝X受体激动剂(T0901317)上调(以无菌磷酸缓冲盐溶液代替T0901317作为对照组)或siRNA下调(以mock-siRNA代替siRNA作为模拟转染组)滋养细胞中ABCA1的表达水平并应用RT-PCR及Western-blot进行验证,采用Amplex胆固醇检测试剂盒检测ABCA1表达改变后滋养细胞在实验开始后的2小时、4小时、6小时及8小时胆固醇流出率。结果:从足月胎盘中分离出原代滋养细胞,其纯度在90%以上,ABCA1在滋养细胞中存在表达。加入T0901317后,滋养细胞中ABCA1在蛋白水平的表达量(0.37±0.04)明显高于对照组(0.08±0.02),差异有统计学意义(P<0.05);而在转染siRNA后,滋养细胞中ABCA1在蛋白水平的表达量(0.10±0.01)低于对照组(0.16±0.02),差异有统计学意义(P<0.05)。在ABCA1表达上升后2小时、4小时、6小时、8小时,滋养细胞胆固醇流出率与对照组相比明显升高(4.70±0.03 vs 3.39±0.00、7.66±0.05 vs 5.28±0.02、14.73±0.03 vs 8.66±0.02、20.94±0.07 vs 13.47±0.03),差异均有统计学意义(P<0.05);而当ABCA1表达量下降后2小时、4小时、6小时、8小时,滋养细胞胆固醇流出率与对照组相比明显降低(2.30±0.03 vs 3.53±0.02、3.35±0.03 vs 5.17±0.01、5.37±0.05 vs 7.01±0.02、7.56±0.06 vs 11.49±0.03),差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:当胎盘中ABCA1表达出现异常时,可通过影响滋养细胞胆固醇的转运而导致母胎界面脂质代谢出现紊乱。 |
| 关键词: ATP结合盒转运蛋白A1 胎盘 滋养细胞 脂质代谢 |
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| 基金项目:国家自然科学基金(编号:81471476)； |
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