| 摘要: |
| 目的:探讨滋养细胞STAT3基因介导表观遗传学调控对子痫前期（PE）发病中的影响机制。方法:收集30例正常（Con组）和30例子痫前期（PE组）产妇胎盘组织,采用Real time-PCR和Western blot检测DNMT1、STAT3、PTEN、TSC2 mRNA和蛋白表达水平,甲基化DNA免疫共沉淀测序（MeDIP-Seq）检测甲基化程度差异。体外培养HTR8/Svneo、JEG-3、JAR、BeWo滋养细胞株,分为空白对照组（Con组）、STAT3沉默组（shSTAT3组）、STAT3过表达组(STAT3OE组)。应用去甲基药物（5-AZA-DC）处理,采用GST-pull down,染色质免疫共沉淀实验（CHIP）,双荧光素酶报告基因,甲基化特异性PCR（MSP）和亚硫酸盐测序PCR（BSP）检测。结果:（1）在胎盘组织中,与Con组相比,PE组胎盘组织中DNMT1 mRNA和蛋白[（5.25±1.12 vs 8.02±0.67）ng/ml、（3.33±0.98 vs 7.31±0.55）μg/ml,P<0.05]表达升高,STAT3[（5.17±0.98 vs 2.27±0.33）ng/ml、（6.12±1.03 vs 2.59±0.43）μg/ml,P<0.05]、PTEN[（4.58±0.77 vs 1.97±0.28）ng/ml、（6.21±1.04 VS 2.28±0.36）μg/ml,P<0.05]、TSC2[（6.39±0.83 vs 3.16±0.52）ng/ml、（6.56±0.67 vs 3.03±0.17）μg/ml,P<0.05]mRNA和蛋白表达下降。MeDIP-Seq检测出PE组甲基化水平显著增高,其中STAT3、PTEN、TSC2基因为甲基化差异显著基因,差异有统计学意义（P<0.05）。（2）在细胞株中,与Con组相比,GST-pull down验证HTR8/Svneo细胞中STAT3与PTEN、TSC2蛋白体外相互作用,CHIP证实在HTR8/Svneo、JEG-3、JAR、BeWo细胞中STAT3能明显富集靶基因PTEN,双荧光素酶报告基因验证HTR8/Svneo、JEG-3、JAR、BeWo细胞中STAT3调控PTEN启动子活性,5-AZA-DC干预后显著改善,差异有统计学意义（P<0.05）。MSP和BSP检测HTR8/Svneo细胞中PTEN基因启动子区CpG岛DNA甲基化,5-AZA-DC干预前shSTAT3、STAT3OE组甲基化显著,干预后呈非甲基化,差异有统计学意义（P<0.05）。结论:STAT3基因是介导表观遗传学调控引起PE发病的重要基因,可作为子痫前期表观遗传学治疗的潜在靶点 |
| 关键词: STAT3 表观遗传学调控 子痫前期 影响 机制 |
| DOI： |
|
| 基金项目:广东省自然科学基金（编号:2016A030313419）； 广东省医学科研基金（编号:A2018328）； 广东省中医药局科技项目（编号:20191256）； |
|
|
|
| () |
| Abstract: |
|
| Key words: |
